分子病理技术服务-科锐诺生物

原位杂交第三天

1 用1ml含10%热灭清的mabt溶液置换溶液，放置摇床上25分钟，然后用1mlmabt置换，25分钟，再用1mlmabt溶液置换，一小时以上，后用1mlmabt溶液置换，25分钟。

2 用1ml 1mm左旋米睉的staining buffer洗三次，分子病理技术服务，每次放置五分钟。

3将胚胎转入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul bm purple ap substrate底物，用之前加5mm左旋米唑，十六孔板外面包上锡箔纸以避光，避免摇动，室温下显色。

4每隔一小时观察胚胎是否开始显色

5将显色完全的胚胎中的底物吸出，用pbst洗两三次后加上4%---固定，拍照。

64c冰箱保存。