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原位末端凋亡检测tunel
实验原理: tunel技术可对组织或细胞中凋亡小体或单个凋亡细胞进行染色,能准确反映细胞凋亡典型的生物化学和形态特征。凋亡细胞内内源性---内切酶被而将自身染色体dna切断成缺口或3-oh末端片段这一特点,利用脱氧核苷酸末端转移酶将标有标记物(如,生物素或荧光素)的脱氧核苷酸转移到3-oh末端,植物染色体原位杂交检测技术服务,再用组化法或荧光检测凋亡细胞。
点对点酵母双杂交验证实验流程
1、诱饵蛋白毒性及自激1活检测;
2、共转化:分别将诱饵/捕获质粒pgbkt7-bait/pgadt7-prey、阳性对照质粒pgbkt7-p53/pgadt7-t、阴性对照质粒pgbkt7-lam/pgadt7-t分别共转到y2h gold感受态细胞中,涂布于ddo平板培养;
3、点板验证:分别从平板上挑单克1隆稀释10倍、100倍、1000倍,然后点板到tdo/x/a和qdo/x/a固体培养基进行验证;
4、实验数据与报告整理。
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